Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
474,48 PF-03814735 est un nouvel inhibiteur puissant et réversible d'Aurora A/B avec IC50 de 0,8 nM/5 nM, est moins puissant pour Flt3, FAK, TrkA, et peu actif vis-à-vis de Met et FGFR1. Phase 1.
Activité biologique Dans les cellules intactes, l'activité inhibitrice de PF-03814735 sur les kinases Aurora1 et Aurora2 réduit les niveaux de phospho-Aurora1 (Thr 232, un marqueur sensible de l'activité Aurora1, avec IC50 ~ 20 nM), phosphohistone H3 (avec IC50 ~ 50 nM) et phospho-Aurora2 (avec IC50 ~ 150 nM). PF-03814735 produit un blocage de la cytokinèse, entraînant une inhibition de la prolifération cellulaire et la formation de cellules polyploïdes multinucléées. Une recherche récente indique que le cancer du poumon à petites cellules (SCLC) et, dans une moindre mesure, les lignées de cancer du côlon sont très sensibles au PF-03814735. Le statut de la famille de gènes Myc et des membres de la voie du rétinoblastome est en corrélation significative avec l'efficacité de PF-03814735. L'administration orale une fois par jour de ≥ 20 mg/kg de PF-03814735 pendant 10 jours à des souris porteuses de xénogreffes HCT-116 a entraîné une inhibition de la croissance tumorale statistiquement significative et dose-dépendante de ≥ 50 % par rapport aux souris traitées avec le véhicule. L'inhibition est associée à une réduction des taux d'histone H3 phosphorylée. Une efficacité antitumorale significative en monothérapie est observée dans cinq autres modèles de tumeurs xénogreffes, dont le carcinome ovarien A2780, le carcinome mammaire MDA-MB-231, les carcinomes colorectaux colo-205 et SW620 et la leucémie aiguë promyélocytaire HL-60. Des expériences in vivo avec deux modèles de xénogreffe SCLC confirment la sensibilité des modèles induits par le gène Myc à PF-03814735 et une possible dépendance au calendrier des tumeurs induites par MYC/c-Myc.
Essais de kinases recombinantes Les protéines Aurora1 et Aurora2 sont produites sous forme de protéines recombinantes His-tag pleine longueur exprimées dans des cellules d'insectes. Pour le dosage Aurora2 kinase, la phosphorylation du peptide substrat par la protéine Aurora2 recombinante est évaluée par un dosage Z'-LYTE à 3 à 300 M d'ATP et différentes concentrations de PF-03814735 sur 60 minutes, à une concentration de peptide substrat de 2 M ( LRRWSLG biotinylé, ×4). La phosphorylation est linéaire sur ce temps pour toutes les conditions. Pour le dosage de la kinase Aurora1, la phosphorylation du peptide substrat par la protéine Aurora1 recombinante est évaluée par un dosage de proximité par scintillation dans un format de plaque à 96 puits dans lequel l'incorporation de 33P dans le substrat peptidique (LRRWSLG biotinylé, ×4) est mesurée par capture le peptide sur une bille d'essai de proximité par scintillation streptavidine.
Méthode Les lignées cellulaires sont cultivées dans des milieux appropriés et évaluées après 48 h d'exposition au PF-03814735 ou au véhicule, suivies d'une détermination du nombre de cellules dans un compteur Coulter. La prolifération (telle que mesurée par une augmentation du nombre de cellules) est exprimée en pourcentage de témoins non traités. Pour évaluer le temps d'exposition PF-03814735 requis pour l'activité antiproliférative, des cultures cellulaires HL-60 sont cultivées dans du milieu RPMI supplémenté de 15 % de sérum bovin fœtal inactivé par la chaleur et exposées à différentes concentrations de PF-03814735 pendant 4, 8, 12, 24, et 48 heures, suivies d'une étape de lavage et d'une incubation avec un milieu de croissance sans PF-03814735 pour le reste de la période de test de 72 heures. L'exposition continue au PF-03814735 pendant 72 heures est également évaluée. Les comptes de cellules sont déterminés par un compteur Coulter.

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur d'Aurora Kinase