Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
372,38 PF-04217903 est un inhibiteur sélectif de c-Met compétitif avec l'ATP avec une CI50 de 4,8 nM, sensible aux mutations oncogènes (aucune activité sur le mutant Y1230C). Phase 1.
Activité biologique Étant plus sélectif que la staurosporine ou le PF-02341066, le PF-04217903 affiche une sélectivité > 1000 fois pour c-Met sur un panel de 208 kinases, bien que plus sensible aux mutations oncogènes de c-Met qui atténuent la puissance que PF-02341066. En plus de WT c-Met, PF-04217903 affiche une puissance similaire pour inhiber l'activité de c-Met-H1094R, c-Met-R988C et c-Met-T1010I avec IC50 de 3,1 nM, 6,4 nM et 6,7 nM, respectivement, mais n'a pas d'activité inhibitrice contre c-Met-Y1230C avec une CI50 >10 M. PF-04217903 en association avec le sunitinib inhibe significativement les cellules endothéliales, mais pas les cellules tumorales B16F1, Tib6, EL4 et LLC PF-04217903 inhibe significativement la croissance clonogénique de LXFA 526L et LXFA 1647L avec des valeurs IC50 de 16 nM et 13 nM, respectivement, produisant un effet additif lorsqu'il est associé au cetuximab. PF-04217903 inhibe puissamment les processus induits par c-Met tels que la croissance cellulaire, la motilité, l'invasion et la morphologie d'une variété de cellules tumorales. Le traitement par PF-04217903 (2 M) a augmenté la mort cellulaire des cellules GTL-16, ce qui implique la régulation négative des protéines phosphorylées 4E-BP1, ERK/MAPK et la voie PI3K/AKT. Bien qu'incapable d'inhiber la croissance tumorale dans les modèles tumoraux B16F1 et Tib6 sensibles au sunitinib, la combinaison de PF-04217903 et de sunitinib inhibe significativement la croissance tumorale dans les modèles tumoraux EL4 et LLC résistants au sunitinib par rapport au sunitinib ou au PF-04217903 seul en bloquant de manière significative expansion vasculaire, indiquant un rôle fonctionnel pour l'axe HGF/c-Met dans les tumeurs résistantes au sunitinib.
Phosphorylation cellulaire de c-Met Des cellules ELISA A549 avec WT c-Met humain endogène sont ensemencées dans des plaques à 96 puits dans un milieu de croissance et cultivées pendant la nuit. Le deuxième jour du dosage, le milieu de croissance est remplacé par du milieu sans sérum (avec 0,04 % de BSA). Des dilutions en série de PF-04217903 sont ajoutées à chaque puits et les cellules sont incubées à 37 °C pendant 1 heure. Ensuite, 40 ng/mL de HGF sont ajoutés aux cellules pendant 20 minutes. Les cellules sont lavées une fois avec du HBSS additionné de 1 mM de Na3VO4, et des lysats de protéines sont générés à partir des cellules en utilisant un tampon de lyse. La phosphorylation de c-Met est évaluée par une méthode ELISA utilisant des anticorps de capture spécifiques de c-Met et un anticorps de détection spécifique des résidus de tyrosine phosphorylés. Les plaques revêtues d'anticorps sont incubées en présence de lysats de protéines à 4 °C pendant une nuit et lavées sept fois avec du Tween 20 à 1 % dans du PBS. HRP-PY20 (anti-phosphotyrosine conjuguée à la peroxydase de raifort) est diluée à 1:500 dans du tampon de blocage et ajoutée à chaque plaque pendant 30 minutes. Les plaques sont ensuite lavées à nouveau et le substrat de peroxydase TMB est ajouté pour initier la réaction colorimétrique dépendante de la HRP et la réaction est arrêtée par l'ajout de H2SO4 0,09 N. Les points finaux ELISA sont l'absorbance mesurée à 450 nm à l'aide d'un spectrophotomètre. La valeur IC50 est calculée par l'ajustement de la courbe concentration-réponse à l'aide d'une méthode analytique à quatre paramètres basée sur Microsoft Excel.

Groupes de Produits : Protéine Tyrosine Kinase > Inhibiteur c-Met