Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
294,30 AG-490 (Tyrphostine B42) est un inhibiteur de l'EGFR avec une IC50 de 0,1 M, 135 fois plus sélectif pour l'EGFR que pour ErbB2, inhibe également JAK2 sans activité à Lck, Lyn, Btk, Syk et Src.
Activité biologique AG-490 inhibe la prolifération cellulaire entraînée par HER-2 avec une CI50 de 3,5 M. Correspondant à l'inhibition dose-dépendante spécifique de JAK2 activé de manière constitutive dans les cellules de leucémie aiguë pré-B (LAL), AG-490 (5 M) bloque presque complètement la croissance de toutes les cellules TOUS en induisant la mort cellulaire programmée, sans effet délétère sur hématopoïèse normale. AG-490 n'inhibe pas les activités de Lck, Lyn, Btk, Syk et Src. AG-490 (60-100 M) bloque l'activation constitutive de Stat3sm et inhibe la croissance spontanée et induite par l'interleukine 2 des cellules tumorales du mycosis fongoïde (MF) avec des valeurs IC50 de 75 M et 20 M, respectivement. AG-490 inhibe puissamment la croissance des cellules T humaines médiées par l'IL-2 avec une CI50 de 25 M en bloquant les activités de JAK3 et STAT5a/b. Bien que AG-490 seul n'ait aucun effet sur la prolifération des cellules FDrv210H à une concentration de 5 M, AG-490 peut se synergiser avec STI571 pour renforcer son effet inhibiteur sur la prolifération induite par p210bcr-abl. AG-490 inhibe de manière significative l'activation constitutive de Stat3 dans les cellules MOPC, MPC11 et S194, conduisant à une apoptose dose-dépendante dramatique. AG-490 (100 M) inhibe la phosphorylation d'Akt, inhibe l'activation du facteur nucléaire-κB et provoque l'activation de GSK-3β, conduisant à la réduction de c-Myc. AG-490 (50 M) peut induire l'apoptose de cellules BaF3 résistantes à l'imatinib exprimant les mutants T315I et E255K de Bcr-Abl. L'AG-490 à 30 M inhibe non seulement la phosphorylation induite par l'Epo de JAK2 de type sauvage, mais également la phosphorylation constitutive du mutant JAK2 V617F. AG-490 inhibe également puissamment la croissance cellulaire indépendante des cytokines induite par le mutant JAK2 V617F dans les cellules BaF3. L'administration d'AG-490 réduit considérablement le nombre de cellules CD45+ et HLA-DR+ de 48 % et 46 % dans la moelle osseuse de souris non traitées, ainsi que de 38 % et 22 % dans la rate de souris non traitées à des niveaux indétectables. L'administration in vivo d'AG-490 provoque l'apoptose des cellules tumorales du myélome murin mais n'inhibe pas l'activation des macrophages médiée par l'IL-12 et la production d'IFN-γ par les lymphocytes. Conformément au blocage in vitro de l'activité du mutant JAK2 V617F, le traitement par AG-490 à 0,5 mg/jour pendant 10 jours inhibe efficacement la tumorigenèse induite par le mutant JAK2 V617F et l'invasion des cellules tumorales chez la souris nude. La thérapie combinée avec AG-490 et IL-12 induit des effets antitumoraux plus importants que l'un ou l'autre agent seul dans un modèle de tumeur de myélome murin.
L'autophosphorylation in vitro de la kinase AG-490 est dissoute dans du DMSO 10%-H2O-éthanol 45%. Les extraits bruts de membrane (0,125 µg/mL) sont préactivés avec de l'EGF (20 nM) dans du tampon HEPES 50 mM, pH 7,6 et NaCl 125 mM, pendant 15 minutes à 4°C. L'activité d'autophosphorylation de l'EGFR ou de la kinase ErbB2 est dosée à 4°C pendant 30 secondes dans des plaques 96 puits en forme de V. Des extraits membranaires (8 L) sont ajoutés à chaque puits contenant le mélange réactionnel (12 L, 50 mM, HEPES, pH 7,4,125 mM NaCl, 12 mM M8Ac2, 2 mM MnCl2, 1 mM NaVO3, 1 M ATP et 1 Ci[γ -32P]ATP, concentrations finales) et des concentrations croissantes d'AG-490 (4 L). Après avoir terminé par addition de tampon d'échantillon chaud, les échantillons sont analysés sur un minigel d'électrophorèse sur gel de SDS-polyacrylamide à 6 %, les gels séchés et une autoradiographie effectuée pendant la période de temps d'exposition linéaire. Les bandes réceptrices sont scannées par densitrométrie et les résultats analysés par le programme Ez-Fit. Pour l'analyse de l'autophosphorylation de JAK2, JAK2 est immunoprécipité en utilisant des anticorps anti-JAK2 issus de lysats de cellules G2 prétraités pendant 16 heures avec des concentrations croissantes d'AG-490 (0-50 µM). Les complexes immuns sont ensuite immunoblots avec un anticorps anti-phosphotyrosine. Une inhibition dose-dépendante de l'activité kinase in vitro est démontrée en évaluant l'autophosphorylation de JAK2.

Groupes de Produits : Protéine Tyrosine Kinase > Inhibiteur d'EGFR