Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px;}
Poids moléculaire :
547,96 TAK-285 est un nouvel inhibiteur double HER2 et EGFR (HER1) avec IC50 de 17 nM et 23 nM, sélectivité >10 fois pour HER1/2 que HER4 , moins puissant pour MEK1/5, c-Met, Aurora B, Lck, CSK etc. Phase 1.
Activité biologique Parmi les 34 kinases testées, TAK-285 n'inhibe significativement HER4 avec IC50 de 260 nM, inhibe légèrement MEK1, MEK5, c-Met, Aurora B, Lck, CSK et Lyn B avec IC50 de 1,1 M, 5,7 M, 4,2 M, 1,7 M, 2,4 M, 4,7 M et 5,2 M, respectivement, et ne présente aucune activité contre d'autres kinases avec IC50 de > 10 M. TAK-285 montre une activité inhibitrice de croissance significative contre les cellules BT-474 (lignée cellulaire de cancer du sein humain surexprimant HER2) avec une GI50 de 17 nM. Par rapport au SYR127063, un puissant inhibiteur de HER2, le TAK-285 affiche une puissance in vitro similaire contre HER2 et EGFR. Par rapport aux domaines cytoplasmiques complets des protéines de type sauvage, les mutations et les limites raccourcies utilisées pour la détermination de la structure de HER2-KD et EGFR-KD ne modifient pas significativement l'activité inhibitrice (IC50) de TAK-285. TAK-285 se lie à la conformation inactive de l'EGFR et présente un mode de liaison similaire avec le lapatinib dans le site actif. La biodisponibilité orale du TAK-285 est de 97,7 % chez le rat et de 72,2 % chez la souris à la dose de 50 mg/kg. L'administration orale de TAK-285 à 100 mg/kg deux fois par jour pendant 14 jours affiche une efficacité antitumorale significative dans le modèle murin de xénogreffe de tumeur BT-474 surexprimant HER2 avec un rapport tumeur/témoin (T/C) de 29 %, sans affecter le poids corporel . Semblable au modèle BT-474, le TAK-285 présente une inhibition de la croissance tumorale dose-dépendante des xénogreffes 4-1ST (tumeur du cancer gastrique humain surexprimant HER2) chez la souris, avec un T/C de 44 % et de 11 % à des doses de 50 mg /kg et 100 mg/kg, deux fois par jour, respectivement, sans perte significative de poids corporel chez la souris. De plus, le traitement par TAK-285 induit une inhibition de la croissance dose-dépendante des tumeurs 4-1ST chez le rat avec un T/C de 38 % et 14 % aux doses de 6,25 mg/kg et 12,5 mg/kg, et, particulièrement, une régression tumorale avec T/C de -12 % et -16 % aux doses de 25 mg/kg et 50 mg/kg, respectivement. Après administration orale de TAK-285, une quantité significative de TAK-285 est présente dans le cerveau de rats sous forme pharmacologiquement active et non liée (environ 20 % de son taux plasmatique libre), indiquant que le TAK-285 a un potentiel thérapeutique. des malignités/métastases du SNC.
Dosage des kinases HER2 et EGFR Le domaine cytoplasmique (acides aminés 676-1255) de HER2 humain et le domaine cytoplasmique (acides aminés 669-1210) de l'EGFR humain sont exprimés sous forme de protéine marquée par le peptide N-terminal (DYKDDDD) à l'aide d'un baculovirus système d'expression. La kinase HER2 et la kinase EGFR exprimées sont purifiées par gel d'affinité anti-FLAG M2. Les dosages de l'EGFR et de la kinase HER2 sont réalisés en utilisant du [γ-32P]ATP radiomarqué dans des plaques 96 puits. Les réactions de kinase sont effectuées dans 50 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 5 mM de MnCl2, 0,01 % de Tween 20 et 2 mM de DTT contenant 0,9 uCi de [γ-32P]ATP par réaction, 50 M d'ATP, 5 ug/mL poly(Glu)-Tyr (4:1), et chaque domaine cytoplasmique purifié (0,25 g/mL EGFR ou HER2) dans un volume total de 50 μL. Pour mesurer la valeur IC50 pour l'inhibition de l'enzyme, des concentrations croissantes de TAK-285 sont incubées avec l'enzyme pendant 5 minutes avant la réaction à température ambiante. Les réactions de kinase sont initiées en ajoutant de l'ATP. Après 10 minutes à température ambiante, les réactions sont stoppées par l'ajout d'acide trichloracétique à 10 % (concentration finale). Les protéines -32P phosphorylées sont filtrées dans une plaque de récolte avec un collecteur de cellules et lavées sans [γ-32P]ATP avec 3% d'acide phosphorique. Les plaques sont séchées puis additionnées de 25 L de MicroScint0. La radioactivité est comptée par un compteur à scintillation TopCount. Les valeurs IC50 sont calculées par analyse de régression non linéaire des pourcentages d'inhibition.

Groupes de Produits : Protéine Tyrosine Kinase > Inhibiteur d'EGFR