Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
463,48 YO-01027 (Dibenzazépine) est un inhibiteur dipeptidique de la γ-sécrétase avec une CI50 de 2,6 nM et 2,9 nM pour le clivage APPL et Notch, respectivement.
Activité biologique YO -01027 interagit directement avec le complexe γ-secrétase et cible le fragment N-terminal de la préséniline. Des concentrations croissantes de YO-01027 administrées aux cellules exprimant APPL ou Notch entraînent l'accumulation progressive de fragments APPL CTF et une diminution de la production de NICD de manière strictement dose-dépendante. 10 M de YO-01027 réduisent le nombre et l'activité des cellules souches du cancer du sein (BCSC). Une recherche récente indique que YO-01027 altère la biosynthèse de la protéine mucine MUC16 d'une manière dépendante de la concentration dans les cellules indifférenciées aux stades préconfluent et confluent par inhibition de Notch, mais pas dans les cellules stratifiées postmitotiques. YO-01027, qui est administré à 1 mg/mL par injection ip le jour de l'injection cellulaire et tous les 3 jours suivants, YO-01027 diminue significativement les tumeurs MCF7 mais pas MDA-MB-231 et augmente la latence par rapport aux souris témoins (18 -28 jours). Les tumeurs MCF7 traitées par YO-01027 qui se sont formées avaient des volumes tumoraux significativement réduits. Le traitement de YO-01027 chez des souris C57BL/6 inhibe la prolifération des cellules épithéliales et induit la différenciation des cellules caliciformes dans les adénomes intestinaux de manière dose-dépendante.
Inhibition pharmacologique de l'activité -sécrétase Pour YO-01027, des expériences pilotes sont réalisées avec différentes concentrations de médicaments allant de 0,1 nM à 250 nM pour déterminer la plage linéaire efficace et la dose d'inhibition maximale pour YO-01027. YO-01027 est ajouté aux concentrations requises au milieu cellulaire S2 lors de l'induction de l'expression Notch ou APPL, 6 heures avant la récolte des protéines. Pour chaque échantillon, YO-01027 est également inclus à la concentration correspondante dans le tampon de lyse pour l'extraction des protéines et l'analyse par immunoblot.
Méthode Les cellules sont remises en suspension à ≤1 × 106 dans 100 L de tampon de tri (PBS contenant 0,5% d'albumine de sérum bovin, 2 mM EDTA) et incubées avec des anticorps primaires préconjugués BEREP4-FITC (1:10), CD44-APC (1 : 20) et CD24-PE (1:10) pendant 10 minutes à 4 °C. Les cellules sont lavées en PBS et centrifugées à 800 xg pendant 2 minutes. Pour l'analyse, les cellules sont remises en suspension dans 500 L de tampon de tri et la fluorescence est mesurée à l'aide de FACSCalibur et analysée à l'aide de WinMIDI 2.8. Pour le tri, les cellules sont remises en suspension dans 1x HBSS après incubation avec les anticorps primaires. Les cellules sont triées, avec HBSS comme fluide de gaine, à 16 psi en utilisant FACSAria. La population de cellules CD24low bloquée par FACS est le quintile le plus bas de cellules CD24-positives plus toutes les cellules CD24-négatives.

Groupes de Produits : Protéases > Inhibiteur gamma-sécrétase