Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px;}
Poids moléculaire :
319,36 PP-121 est un inhibiteur multi-cible de PDGFR, Hck, mTOR, VEGFR2, Src et Abl avec IC50 de 2 nM, 8 nM, 10 nM, 12 nM, 14 nM et 18 nM, inhibe également l'ADN-PK avec une CI50 de 60 nM.

Activité biologique La sélectivité de PP-121 interagit au sein d'une poche hydrophobe qui est conservée entre les tyrosine kinases et PI3K, et non les sérine-thréonine kinases. PP-121 établit une liaison hydrogène avec Glu310 dans Src, se substituant efficacement au rôle structurel de la lysine catalytique et entraînant l'ordre de l'hélice C et la stabilisation d'une conformation active. PP-121 inhibe également d'autres PI3K, y compris p110α et DNA-PK avec une CI50 de 52 nM et 60 nM, respectivement. Le PP-121 bloque de manière puissante et dose-dépendante la phosphorylation d'Akt, p70S6K et S6 dans deux lignées cellulaires de glioblastome, U87 et LN229. PP-121 inhibe puissamment la prolifération d'un sous-ensemble des lignées cellulaires tumorales par inhibition directe de PI3Ks et mTOR. PP-121 induit un arrêt G0/G1 dans les cellules LN220, U87 et Seg1. PP-121 bloque également la phosphorylation de la tyrosine induite par v-Src dans les cellules NIH3T3 transformées avec v-Src(Thr338). PP-121 pourrait restaurer la coloration des fibres de stress d'actine dans les cellules NIH3T3 transformées avec v-Src(Thr338). Le PP-121 à une faible concentration de 40 nM inhibe l'autophosphorylation de Ret dans les cellules de carcinome thyroïdien TT qui expriment le mutant oncogène Ret C634W35. Le PP-121 inhibe la prolifération cellulaire avec une CI50 de 50 nM dans les cellules de carcinome thyroïdien TT. Le PP-121 inhibe la prolifération cellulaire stimulée uniquement par le VEGF avec une CI50 de 41 nM dans les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (HUVEC). Le PP-121 inhibe directement la phosphorylation de la tyrosine induite par Bcr-Abl, entraînant une apoptose induite par le médicament dans les cellules K562 et une combinaison d'apoptose et d'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules BaF3 exprimant Bcr-Abl.
Dosages de kinase Les domaines de kinase purifiés sont incubés avec du PP-121 à des dilutions de 2 ou 4 fois sur une plage de concentration de 1 nM à 50 µM ou avec un véhicule (0,1 % de DMSO) en présence de 10 µM d'ATP, 2,5 µCi de γ -32P-ATP et substrat. Les réactions sont terminées par dépôt sur des membranes de nitrocellulose ou de phosphocellulose, selon le substrat ; cette membrane est ensuite lavée 5 à 6 fois pour éliminer la radioactivité non liée et séchée. La radioactivité transférée est quantifiée par imagerie phosphorescente et les valeurs IC50 sont calculées en ajustant les données à une dose-réponse sigmoïde à l'aide du logiciel Prism.
Méthode Pour l'analyse western blot, les cellules sont cultivées dans des plaques à 12 puits et traitées avec du PP-121 aux concentrations ou au véhicule indiqués (0,1 % de DMSO). Les cellules traitées sont lysées, les lysats sont résolus par SDS-PAGE, transférés sur nitrocellulose et transférés. Pour les tests de prolifération cellulaire, les cellules sont cultivées dans des plaques à 96 puits sont traitées avec du PP-121 à des dilutions de 4 fois (10 uM - 0,040 uM) ou un véhicule (0,1 % de DMSO). Après 72 heures, les cellules sont exposées au sel de sodium de résazurine (22 uM) et la fluorescence est quantifiée. Les valeurs IC50 sont calculées à l'aide du logiciel Prism. Pour les tests de prolifération impliquant le comptage de cellules individuelles, les cellules non adhérentes sont plaquées à faible densité (3 à 5 % de confluence) et traitées avec du PP-121 (2,5 µM) ou un véhicule (0,1 % de DMSO). Les cellules sont diluées quotidiennement dans du bleu trypan et les cellules viables sont comptées à l'aide d'un hémocytomètre. Pour l'apoptose et l'analyse du cycle cellulaire, les cellules sont traitées avec la concentration indiquée de PP-121 ou de véhicule (0,1 % de DMSO) pendant 24 à 72 heures. Les cellules sont soit colorées en direct avec AnnexinV-FITC soit fixées avec de l'éthanol et colorées avec de l'iodure de propidium. Les populations cellulaires sont séparées à l'aide d'un cytomètre en flux FacsCalibur ; les données sont collectées à l'aide du logiciel CellQuest Pro et analysées avec le logiciel ModFit ou FlowJo.

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur HDAC