Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
557,04 Le nératinib (HKI-272) est un inhibiteur hautement sélectif de HER2 et d'EGFR avec une CI50 de 59 nM et 92 nM ; inhibe faiblement KDR et Src, aucune inhibition significative pour Akt, CDK1/2/4, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf et c-Met. Phase 3.
Activité biologique Le nératinib inhibe faiblement les tyrosine kinases KDR et Src avec une CI50 de 0,8 M et 1,4 M, respectivement, étant 14 et 24 fois moins active que HER2. Le nératinib ne présente aucune activité contre d'autres sérine-thréonine kinases telles que Akt, cycline D1/cdk4, cycline E/cdk2, cycline B1/cdk1, IKK-2, MK-2, PDK1, c-Raf et Tpl-2, ainsi comme la tyrosine kinase c-Met. Le nératinib inhibe sélectivement la prolifération des cellules 3T3 transfectées avec le HER2 (3T3/neu), ainsi que deux autres cellules SK-Br-3 et BT474 surexprimant HER-2 avec des valeurs IC50 de 2-3 nM, affichant >230 fois puissance par rapport aux cellules 3T3 non transfectées ainsi qu'aux cellules MDA-MB-435 et SW620 qui sont EGFR et HER2 négatives. Le nératinib inhibe également la prolifération des cellules A431 dépendantes de l'EGFR avec une CI50 de 81 nM. Le nératinib réduit l'autophosphorylation du récepteur HER2 dans les cellules BT474 avec une CI50 de 5 nM, et la phosphorylation EGF-dépendante de l'EGFR dans les cellules A431 avec une CI50 de 3 nM. Le blocage de HER-2 par le nératinib entraîne une inhibition des voies MAPK et Akt en aval avec une CI50 de 2 nM, plus puissante que le trastuzumab. Le nératinib inhibe l'expression de la cycline D1 et la phosphorylation de la production du gène de susceptibilité Rb dans les cellules BT474 avec une CI50 de 9 nM, conduisant à un arrêt de G1-S et finalement à une diminution de la prolifération cellulaire. L'administration orale de Neratinib inhibe significativement la croissance des xénogreffes 3T3/neu, avec une inhibition de 34 %, 53 %, 98 % et 98 % à des doses de 10, 20, 40 et 80 mg/kg/jour, respectivement. Conformément à l'inhibition de la phosphorylation de HER-2 de 84 % dans l'heure suivant l'administration à 40 mg/kg/jour, le nératinib inhibe la croissance des xénogreffes BT474 de 70 à 82 %, 67 % et 93 % à la dose de 5, 10 et 40 mg/kg/jour, respectivement. Le nératinib est également efficace contre les xénogreffes SK-OV-3 avec une inhibition de 31 % et 85 % à 5 et 60 mg/kg/jour, respectivement. Le nératinib est moins puissant contre les xénogreffes A431 dépendantes de l'EGFR que les tumeurs dépendantes de HER-2, avec une inhibition de 32 % et 44 % à 5 et 20 mg/kg/jour, respectivement. Le nératinib affiche une faible activité contre les xénogreffes MCF-7 et MX-1 exprimant de faibles niveaux de HER-2 et d'EGFR, avec seulement 28 % d'inhibition à 80 mg/kg/jour, ce qui suggère que le nératinib a une activité sélective pour les cellules exprimant HER-2 ou EGFR .
Test d'autophosphorylation acellulaire utilisant la fluorométrie résolue en temps Le nératinib est préparé sous forme de stocks de 10 mg/mL dans du DMSO et dilué dans 25 mM HEPES (pH 7,5 ; 0,002 ng/mL-20 g/mL). Des fragments COOH-terminaux recombinants purifiés de HER2 (acides aminés 676-1255) ou du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) (acides aminés 645-1186) [dilué dans 100 mM HEPES (pH 7,5) et 50% de glycérol] est incubé avec des concentrations croissantes de Neratinib dans 4 mM de HEPES (pH 7,5), 0,4 mM de MnCl2, 20 µM de vanadate de sodium et 0,2 mM de DTT pendant 15 minutes à température ambiante dans des plaques ELISA 96 puits. La réaction de kinase est initiée par l'ajout de 40 µM d'ATP et 20 mM de MgCl2 et laissée se dérouler pendant 1 heure à température ambiante. Les plaques sont lavées et la phosphorylation est détectée à l'aide d'anticorps anti-phospho-tyrosine marqués à l'Europium (15 ng/puits). Après les étapes de lavage et de rehaussement, le signal est détecté à l'aide d'un lecteur de fluorescence Victor2 (longueur d'onde d'excitation 340 nm, longueur d'onde d'émission 615 nm). La concentration de Neratinib qui inhibe la phosphorylation des récepteurs de 50 % (CI50) est calculée à partir des courbes d'inhibition. Méthode Les cellules sont exposées à différentes concentrations de Nératinib pendant 2 ou 6 jours. La prolifération cellulaire est déterminée à l'aide de sulforhodamine B, un colorant liant les protéines. Brièvement, les cellules sont fixées avec de l'acide trichloracétique à 10 % et lavées abondamment avec de l'eau. Les cellules sont ensuite colorées avec 0,1 % de sulforhodamine B et lavées dans 5 % d'acide acétique. Le colorant associé aux protéines est solubilisé dans 10 mM de Tris et l'absorbance est mesurée à 450 nM. La concentration de Neratinib qui inhibe la prolifération cellulaire de 50 % (CI50) est déterminée à partir des courbes d'inhibition.

Groupes de Produits : Protéine Tyrosine Kinase > Inhibiteur HER2