Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
189.17 IOX1 est un inhibiteur puissant et à large spectre des oxygénases 2OG, y compris les déméthylases JmjC.
Activité biologique IOX1 augmente les niveaux de H3K9me3 dans les cellules HeLa via l'inhibition de KDM4A sans effet sur la viabilité cellulaire. IOX1 montre une efficacité moindre dans les cellules HeLa en raison de sa faible perméabilité cellulaire, tandis que le dérivé n-octyle ester améliore sa perméabilité cellulaire. Test AlphaScreen Tous les réactifs sont dilués dans 50 mM de HEPES, 0,1 % de BSA, pH 7,5 additionné de 0,01 % de Tween20 et laissés s'équilibrer à température ambiante avant d'être ajoutés aux plaques. Les tests de renouvellement catalytique sont effectués dans des volumes de 10 L dans des plaques de 384 puits à faible volume à température ambiante. La réaction consistait en enzyme (5 nM), peptide substrat biotinylé (30 nM), Fe(II) (1 M), ascorbate (100 M), 2OG (10 M) et exécuté à température ambiante. Pour PHD2, la réaction consistait en enzyme (5 nM), peptide substrat biotinylé (60 nM), Fe(II) (20 M), ascorbate (200 M), 2OG (2 M) et exécuté à température ambiante. L'EDTA est utilisé pour éteindre la réaction (5 L), des billes de donneur AlphaScreen (conjugué à la streptavidine) et d'accepteur (conjugué à la protéine A) préincubées avec des anticorps de produit peptidique sont ajoutées (5 L). Les plaques sont scellées pour protéger de la lumière, incubées à température ambiante pendant 60 minutes et lues sur un lecteur de plaques PHERAstar FS à l'aide d'un ensemble de filtres d'excitation/émission 570 AlphaScreen 680. La concentration finale des billes dans 20 L de réaction est de 20 g/mL. Les valeurs IC50 sont calculées dans Prism 6 après normalisation par rapport aux contrôles DMSO correspondants. Méthode Les activités antiprolifératives des composés sont déterminées par le test MTT. Les cellules HeLa sont ensemencées dans des plaques à 96 puits et cultivées à 37 °C pendant 24 h pour atteindre 70 %. Par la suite, le milieu est remplacé par du milieu DMEM contenant les composés testés à différentes concentrations de 1 à 300 µM dans 1% de DMSO. La staurosporine en concentration finale de 0,03 à 10 M est utilisée comme témoin de cytotoxicité. Après 24 h de traitement, le milieu est remplacé par du CellTiter 96 Aqueous One Solution Reagent et incubé pendant 4 heures. Les valeurs de CC50 sont calculées dans le logiciel Prism 6 après normalisation par rapport aux cellules correspondantes traitées au DMSO à 1 % et au DMSO à 1 % dans les témoins de milieu (sans cellules).

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur de l'histone déméthylase