Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
572,74 EPZ-6438 est un inhibiteur EZH2 puissant et sélectif avec Ki et IC50 de 2,5 nM et 11 nM, présentant une sélectivité de 35 fois par rapport à EZH1 et > 4 500- sélectivité par rapport à 14 autres HMT.
Activité biologique L'EPZ-6438 réduit en fonction de la concentration les niveaux globaux de H3K27Me3 dans les cellules de type sauvage ou mutantes SMARCB1, et induit de puissants effets antiprolifératifs avec une CI50 allant de 32 nM à 1 000 nM dans la MRT supprimée par SMARCB1. lignées cellulaires. EPZ-6438 induit l'expression des gènes de la différenciation neuronale et de l'inhibition du cycle cellulaire, tandis qu'inhibe l'expression des gènes de la voie Hedgehog, MYC et EZH2. L'effet antiprolifératif de l'EPZ-6438 est renforcé par la prednisolone ou la dexaméthasone dans plusieurs lignées cellulaires de lymphome mutantes EZH2. Chez les souris SCID portant des xénogreffes sc G401, EPZ-6438 induit une stase tumorale pendant la période d'administration et produit un retard de croissance tumoral significatif avec un effet minimal sur le poids corporel. Méthodes biochimiques EPZ-6438 est incubé pendant 30 min avec 40 L par puits de 5 nM de PRC2 (la concentration finale d'essai dans 50 L est de 4 nM) dans un tampon d'essai 1X (20 mM Bicine [pH 7,6], 0,002 % Tween-20, 0,005 % de gélatine de peau bovine et 0,5 mM de DTT). 10 L par puits de mélange de substrats comprenant le tampon de dosage 3 H-SAM, SAM non marqué et le peptide représentant les résidus d'histone H3 21-44 contenant de la biotine C-terminale (ajoutée à une lysine coiffée d'un amide C-terminal) sont ajoutés pour initier la réaction (les deux substrats sont présents dans le mélange réactionnel final à leurs valeurs Km respectives, un format d'essai appelé « conditions équilibrées ». Les concentrations finales des substrats et l'état de méthylation du peptide substrat sont indiqués pour chaque enzyme. Les réactions sont incubées pendant 90 min à température ambiante et trempé avec 10 L par puits de 600 M SAM non marqué, puis transféré dans une plaque flash de 384 puits et lavé après 30 min. sur les courbes de croissance (mesurées par la teneur en ATP) et la densité sur une période de 7 jours. La veille du traitement par composé, les cellules sont étalées dans des plaques à 96 puits en triple (pour la période de 0 à 7 jours) ou des plaques à 6 puits (pour le replaquage au jour 7 pour le reste du temps). Au jour 0, les cellules sont soit non traitées, soit traitées au DMSO, soit traitées avec EPZ-6438 en commençant à 10 uM et en diminuant dans des dilutions triples ou quadruples. Les plaques sont lues au jour 0, au jour 4 et au jour 7 à l'aide de Cell Titer Glo, le composé/le milieu étant réapprovisionné au jour 4. Le jour 7, les plaques à six puits sont trypsinisées, centrifugées et remises en suspension dans un milieu frais pour le comptage par Vi-Cellule. Les cellules de chaque traitement sont replaquées à la densité d'origine dans des plaques à 96 puits en triple. Les cellules sont autorisées à adhérer à la plaque pendant la nuit et les cellules sont traitées comme au jour 0. Aux jours 7, 11 et 14, les plaques sont lues à l'aide de Cell Titer Glo, le composé/média étant reconstitué au jour 11. Les moyennes des triples sont utilisé pour tracer la prolifération au cours du temps et calculer les valeurs IC50. Pour le cycle cellulaire et l'apoptose, les cellules G401 et RD sont étalées dans des boîtes de 15 cm en double à une densité de 1 × 106 cellules par boîte. Les cellules sont incubées avec EPZ-6438 à 1 µM, dans un total de 25 ml, sur une période de 14 jours, les cellules étant divisées à nouveau à la densité de placage d'origine aux jours 4, 7 et 11. L'analyse du cycle cellulaire et le test TUNEL sont réalisée à l'aide d'un cytomètre en flux Goyave, selon le protocole du fabricant.

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur de l'histone méthyltransférase