Description du produit
.cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px;}
Poids moléculaire : 428.43 Wortmannin est le premier inhibiteur PI3K décrit avec IC50 de 3 nM, avec peu de sélectivité au sein de la famille PI3K. Bloque également la formation d'autophagosomes et inhibe puissamment l'ADN-PK/ATM avec une CI50 de 16 nM et 150 nM.
L'inhibition de MLCK par Wortmannin n'est pas affectée par la calmoduline ou le substrat peptidique, alors qu'elle est réduite par une concentration élevée d'ATP. La wortmannine interagit directement avec le domaine catalytique de la MLCK et conduit à une perte irréversible de l'activité enzymatique. La wortmannine n'a aucun effet inhibiteur sur la protéine kinase dépendante de l'AMPc, la protéine kinase dépendante du GMPc et la protéine kinase II dépendante de la calmoduline, et a peu d'effet sur l'activité de la protéine kinase C. Wortmannin inhibe la formation de PtdInsP3 (phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate) stimulée par la N-formylméthionyl-leucylphénylalanine (fMLP) avec une CI50 de 5 nM et cette inhibition est complètement abolie lorsqu'elle est prétraitée avec 100 nM de Wortmannin dans les neutrophiles humains, avec des niveaux accrus de PtdInsP2 aucun effet sur le contenu cellulaire PtdInsP et PtdIns. Wortmannin pourrait développer des changements oscillatoires dans la teneur en F-actine et n'inhibe pas la polymérisation de l'actine stimulée par fMLP dans les neutrophiles. La wortmannine inhibe de manière irréversible l'activité de la phosphatidylinositol 3-kinase (PI3-kinase) en se liant à la protéine de 110 kDa (CI50 de 3 nM) et n'a aucun effet sur la PI4-kinase dans les cellules RBL-2H3. La wortmannine inhibe également à la fois la sécrétion d'histamine médiée par Fc epsilon RI et la libération de leucotriènes, sans effet sur l'activation de la tyrosine kinase Lyn. Wortmannin abolit complètement l'absorption d'hexose induite par l'insuline dans les adipocytes de rat isolés à 0,1 M, sans altérer l'activité lipolytique stimulée par l'isoprotérénol. Wortmannin supprime la production d'oxyde nitrique induite par l'insuline de 50% à 500 nM dans les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine, qui est en réponse à l'IGF-1. La Wortmannin supprime la réparation des cassures double brin (DSB) de l'ADN et n'a aucun effet sur les niveaux de DSB ou la cinétique de la réparation des cassures simple brin (SSB) dans les cellules ovariennes de hamster chinois à 50 M. La wortmannine pourrait potentialiser la cytotoxicité induite par les rayonnements ionisants (IR) sans aucune toxicité en soi. La wortmannine inhibe l'activité de la kinase de type polo (PLK1) IC50 de 24 nM dans les cellules intactes G2/M arrêtées. La wortmannine augmente l'accumulation d'IL-6 induite par le récepteur de type Toll (TLR) dans les macrophages humains avec une CE50 de 50 nM. Pendant ce temps, la wortmannine améliore considérablement l'expression de l'oxyde nitrique synthase inductible (iNOS) médiée par le TLR et l'accumulation de nitrite dans les macrophages de souris. La wortmannine active le facteur nucléaire κB et régule à la hausse la production d'ARNm de cytokine. La wortmannine inhibe également la Polo-like kinase (PlK) 1 et la PlK3, qui jouent un rôle important dans la mitose. Le traitement par la wortmannine pourrait conduire à une réduction de la phosphorylation de p53 sur la sérine 20 induite par des dommages à l'ADN. Wortmannin supprime la phosphorylation d'Akt induite par l'hyaluronane et la motilité/migration cellulaire dans les cellules SW1990. Wortmannin inhibe les métastases péritonéales de SW1990 chez la souris à 1 mg/kg, sans aucune perte de poids. La wortmannine inhibe la phosphorylation de la phosphatidylinositide 3-kinase-protéine kinase B (PKB)/Akt dans les tissus normaux (homogénats pulmonaires, cardiaques et cérébraux) et tumoraux chez la souris, sans mortalité ni toxicité aiguë à 0,7 mg/kg. L'association avec le LY188011, la wortmannine augmente significativement l'apoptose et inhibe la croissance tumorale dans les tumeurs orthotopiques, alors que les deux monothérapies ne le pouvaient pas.
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MLCK assay
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MLCK activity is assayed with peptide substrate (KKRPQRATSNVFS-NH2) or myosin light chain. The peptide substrate (24 μM) is phosphorylated in a reaction mixture containing 25 mM Tris-HC1 (pH 7.5), 0.5 mg/mL bovine serum albumin, 4 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 2.6 nM calmodulin, 1.5 nM MLCK, and 400 μM ATP in a final volume of 0.25 mL. After a 10-min preincubation at 28 ºC without ATP, the reaction is started by addition of ATP at 28 ºC and terminated by the addition of 0.1 mL of 10% (v/v) acetic acid after 30 min. The mixture is analyzed by high performance liquid chromatography: column, Unisil Pack 5C18 4.6 X 150 mm; solvent, 18% (v/v) acetonitrile, 0.1% (v/v) trifluoroacetic acid in water; flow rate, 1.0 mL/min; temperature, 40 ºC; detection, absorbance at 220 nm. Percent of reaction is calculated from the ratio of peak areas of phosphorylated form to those of unphosphorylated form. Specific activity measured under the conditions described above is 0.81 μmol/min/mg. Myosin light chain (108 μg/mL) is phosphorylated in a reaction mixture containing 25 mM Tris-HC1 (pH 7.5), 0.5 mg/mL bovine serum albumin, 4 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 4.2 nM calmodulin, 0.92 nM enzyme, and 10 μM[γ-32P]ATP (100-900 cpm/pmol) in a final volume of 0.25 mL. After a 3-min preincubation at 30 ºC without ATP, the reaction is started by the addition of [γ-32P]ATP at 30 ºC and stopped by the addition of 0.125 mL of trichloroacetic acid after 5 min. The acid-precipitable materials are collected on a nitrocellulose membrane filter and washed with four 1-mL aliquots of 5% (v/v) trichloroacetic acid. The radioactivity on the filter is measured in a toluene scintillation fluid, using a Packard Tri-Carb liquid scintillation spectrometer Model 4530. The specific activity measured under the conditions is 1.23 μmol/min/mg. [1]
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PI3K assay
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In an ordinary solution assay, partially purified PI3-kinase from calf thymus is used at a final concentration of 20 ng/mL. In the case of immunocomplex assay, P13-kinase activity is measured in immunoprecipitates with anti-PI3-kinase p85 antiserum, anti-
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Étude animale : [11]
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Animal Models
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Human pancreatic adenocarcinoma cells PK1 are injected both s.c. and orthotopically into SCID mice.
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Formulation
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Dissolved at 0.4 mg/mL in DMSO, and diluted with 0.9% NaCl before use
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Dosages
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0.175, 0.35, and 0.7 mg/kg
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Administration
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Injected by i.v.
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Solubility
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1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80,
8 mg/mL
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* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Conversion de différents animaux modèles sur la base de la BSA (valeur basée sur les données des lignes directrices provisoires de la FDA)
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Species
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Baboon
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Dog
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Monkey
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Rabbit
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Guinea pig
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Rat
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Hamster
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Mouse
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Weight (kg)
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12
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10
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3
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1.8
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0.4
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0.15
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0.08
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0.02
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Body Surface Area (m2)
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0.6
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0.5
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0.24
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0.15
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0.05
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0.025
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0.02
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0.007
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Km factor
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20
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20
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12
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12
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8
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6
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5
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3
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Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
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Animal B Km
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Animal A Km
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Par exemple, pour modifier la dose de resvératrol utilisée pour une souris (22,4 mg/kg) à une dose basée sur la BSA pour un rat, multiplier 22,4 mg/kg par le facteur Km pour une souris puis diviser par le facteur Km pour un rat. Ce calcul donne une dose équivalente chez le rat pour le resvératrol de 11,2 mg/kg.
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Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
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mouse Km(3)
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= 11.2 mg/kg
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rat Km(6)
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Informations chimiques
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Molecular Weight (MW)
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428.43
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Formula
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C23H24O8
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CAS No.
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19545-26-7
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Storage
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3 years -20℃Powder
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6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
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Synonyms
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Solubility (25°C) *
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In vitro
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DMSO
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86 mg/mL
(200.73 mM)
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Water
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<1 mg/mL
(
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Ethanol
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<1 mg/mL
(
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In vivo
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1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80
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8 mg/mL
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* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
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Chemical Name
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3H-Furo[4,3,2-de]indeno[4,5-h]-2-benzopyran-3,6,9-trione, 11-(acetyloxy)-1,6b,7,8,9a,10,11,11b-octahydro-1-(methoxymethyl)-9a,11b-dimethyl-, (1S,6bR,9aS,11R,11bR)-
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Calculateur de molarité Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire
Groupes de Produits : PI3K/Akt/mTOR > Inhibiteur PI3K
