Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
273,23 SMI-4a est un puissant inhibiteur de Pim1 avec une CI50 de 17 nM, modérément puissant pour Pim-2, n'inhibe de manière significative aucune autre sérine/thréonine ou tyrosine -kinases.
Activité biologique SMI-4a est un inhibiteur compétitif de l'ATP de Pim1 avec une CI50 de 17 nM. SMI-4a montre une sélectivité élevée pour Pim1 contre un panel de kinases. SMI-4a inhibe la phosphorylation in vitro par Pim-1 du substrat connu, le répresseur traductionnel 4E-BP1. Le SMI-4a (5μM) inhibe la croissance des cellules pancréatiques et leucémiques. SMI-4a réduit la phosphorylation de la cible Pim Bad dans la prostate et les cellules hématopoïétiques. SMI-4a provoque l'arrêt du cycle cellulaire et inverse l'activité anti-apoptotique de Pim-1. SMI-4a augmente la quantité de p27Kip1 dans le noyau. Le traitement par SMI-4a du pré-T-LBL inhibe la voie mTOR. SMI-4a réduit l'expression de la protéine MYC dans le pré-T-LBL. Le traitement SMI-4a induit une régulation à la hausse de la voie MAPK. Le traitement au SMI-4a (60 mg/Kg) deux fois par jour réduit significativement la taille de la tumeur et est bien toléré. Les tumeurs récoltées 1 heure après le gavage oral final de SMI-4a démontrent une phosphorylation réduite de p70 S6K par rapport aux tumeurs de souris traitées avec le véhicule, alors qu'en comparaison, l'expression totale de p70 S6K est inchangée.
Test d'activité kinase Les valeurs IC50 pour les inhibiteurs de Pim sont mesurées par un test de kinase couplée comme décrit précédemment avec les modifications suivantes : les tests sont effectués dans 20 mM de MOPS contenant 100 mM de NaCl, 10 mM de MgCl2, 2,5 mM de phosphoénolpyruvate, 0,2 mM de NADH, 30 g/mL de pyruvate kinase, 10 g/mL de lactate déshydrogénase, 2 mM de DTT et 25 nM de Pim-1 avec 100 M de peptide. L'activité est mesurée en surveillant l'oxydation du NADH sous forme de diminution à 340 nm dans un lecteur de microplaques VersaMax à 25 Â. Les réactions sont initiées par l'ajout d'ATP (100 µM), et les inhibiteurs (final 1% DMSO) sont ajoutés juste avant l'ajout d'ATP. Les valeurs IC50 sont déterminées à l'aide d'une régression non linéaire avec le programme GraphPad Prism. Ce test détermine l'activité kinase en mesurant la quantité d'ADP produite, qui est couplée à l'oxydation du NADH par la lactate déshydrogénase et la pyruvate kinase. La capacité de la kinase Pim-1 à phosphoryler les substrats protéiques de pleine longueur 4E-BP1 et p27Kip1 est déterminée comme suit : la Pim-1 purifiée (1 ng) est ajoutée avec 4E-BP1 (2 g) ou p27Kip1 (2 g) et un inhibiteur de Pim dans un tampon de dosage [20 mM de MOPS (pH 7) contenant 100 mM de NaCl, 10 mM de MgCl2 et 2 mM de DTT]. Les dosages sont initiés par l'ajout d'ATP (100 µM) et de [γ-32P]ATP (10 µCi). Les réactions sont laissées se dérouler pendant 15 min à 30 ℃ puis séparées par SDS-PAGE. Les substrats phosphorylés 32P sont visualisés par autoradiographie et quantifiés par densitométrie.

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur Pim