Chine PP2 172889-27-9 Fabricants

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PP2 172889-27-9

Informations de base

Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
301,77 PP2, un inhibiteur de kinase de la famille Src, inhibe puissamment Lck/Fyn avec IC50 de 4 nM/5 nM, ~ 100 fois moins puissant pour l'EGFR, inactif pour ZAP -70, JAK2 et PKA.
Activité biologique PP2 inhibe Src en se liant à une zone de la molécule qui ne chevauche pas le domaine de liaison de l'ATP. PP2 (20 µM) induit une inhibition de 40 à 50 % de la croissance des cellules HT29, cette concentration réduit l'activité Src dès 1 heure et maintient une inhibition de 35 % de l'activité Src pendant 2 jours. PP2 (100 mM) diminue l'activité Src des cellules HT29 de manière dose-dépendante. PP2 (1 mM-100 mM) provoque une inhibition de la croissance dose-dépendante des cellules cancéreuses du côlon humaines (HT29, SW480 et PMCO1), des cellules cancéreuses du foie (PLC/PRF/5, KYN-2, Li7 et HepG2), et cellules cancéreuses du sein (MCF-7, MDA-MB-468 et BT-474). PP2 (20 M) augmente considérablement l'agrégation dans la plupart des cellules cancéreuses (HT29, SW480, PMCO1, PLC/PRF/5, KYN-2, Li7, MCF-7 et MDA-MB-468) de manière dépendante de l'E-cadhérine . PP2 (20 M) améliore l'expression de la E-cadhérine et augmente également fortement l'association de la E-cadhérine avec le cytosquelette d'actine dans les cellules cancéreuses. PP2 (20 M) augmente l'expression de la -caténine, de la -caténine et de la -caténine dans les cellules HT29, alors que dans les cellules PLC/PRF/5 et MCF-7, le niveau de protéine totale de la -caténine ne change pas, mais les niveaux de -caténine et de -caténine augmentent légèrement. PP2 inhibe la prolifération de deux cellules cancéreuses du col de l'utérus (HeLa et SiHa) d'une manière dépendante du temps et de la dose. PP2 (10 M) régule à la baisse les niveaux d'expression de pSrc-Y416, pEGFR-Y845 et -Y1173 dans les cellules HeLa et SiHa. PP2 (10 M) pourrait moduler l'arrêt du cycle cellulaire en régulant à la hausse p21(Cip1) et p27(Kip1) dans les cellules HeLa et SiHa et en régulant à la baisse l'expression de la cycline A et de la kinase-2, -4 dépendante de la cycline (Cdk- 2, -4) dans HeLa et de cycline B et Cdk-2 dans SiHa. PP2 (5 mg/kg/jour) induit un certain ralentissement de la vitesse de croissance des tumeurs primaires par rapport au témoin traité avec le véhicule chez des souris SCID inoculées de cellules HT29 dans la rate. PP2 (5 mg/kg/jour) induit un certain ralentissement de la vitesse de croissance des tumeurs primaires par rapport au témoin traité avec le véhicule chez des souris SCID inoculées de cellules HT29 dans la rate. PP2 (5 mg/kg/jour) réduit significativement le poids relatif du foie et le volume des métastases hépatiques par rapport aux témoins chez les souris SCID inoculées des cellules HT29 dans la rate. Les rats traités par PP2 (1,5 mg/kg ip) présentent une réduction d'environ 50 % de la taille de l'infarctus à l'IRM pondérée en T2 et à la coloration TTC par rapport aux témoins chez les rats présentant une lésion cérébrale ischémique focale. PP2 (1,5 mg/kg ip) donne un meilleur score neurologique que les témoins chez les rats atteints de lésion cérébrale ischémique focale. Protocole (uniquement pour référence) Dosage de la kinase : [1]

Immune complex enzyme assays	The acid-treated enolase is diluted 1:20 with 1&times PBS before aliquoting 100 mL/well into a Nunc 96-well high protein binding assay plate. Assay wells are then aspirated; blocked with 0.5% bovine serum, 1&times PBS for 1 h at 37 ℃;and then washed five times with 300 mL of 1&times PBS/well. The source of Lck is either LSTRA cells or Lck expressed in HeLa cells using a vaccinia expression system. FynT is expressed in HeLa cells using the vaccinia system. Cells (12.5&times 106/mL) are lysed in lysis buffer (20 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.5% Nonidet P-40, and 23 trypsin inhibitory units/mL aprotinin), and the lysates are clarified by centrifugation at 14,000 cpm for 15 min at 4 ℃ in an Eppendorf tube. The clarified lysates are then incubated with the appropriate anti-kinase antibody at 10 μg/mL for 2 h at 4 ℃. Protein A-Sepharose beads are added to the antibody/lysate mixture at 250 μL/mL and allowed to incubate for 30 min at 4 ℃. The beads are then washed twice in 1 mL of lysis buffer and twice in 1 mL of kinase buffer (25 mM HEPES, 3 mM MnCl2, 5mM MgCl2, and 100 μM sodium orthovanadate) and resuspended to 50% (w/v) in kinase buffer. Twenty-five microliters of the bead suspension is added to each well of the enolase-coated 96-well high protein binding plate together with an appropriate concentration of compound and [γ-32P]ATP (25 μL/well of a 200 μCi/mL solution in kinase buffer). After incubation for 20 min at 20 ℃, 60 μLl of boiling 2&times solubilization buffer containing 10 mM ATP is added to the assay wells to terminate the reactions. Thirty microliters of the samples is removed from the wells, boiled for 5 min, and run on a 7.5% SDS-polyacrylamide gel. The gels are subsequently dried and exposed to Kodak X-AR film. For quantitation, films are scanned using a Molecular Dynamics laser scanner, and the optical density of the major substrate band, enolase p46, is determined. In companion experiments for measuring the activity of compounds against Lck, the assay plate is washed with two wash cycles on a Skatron harvester using 50 mM EDTA, 1 mM ATP. Scintillation fluid (100 μL) is then added to the wells, and 32P incorporation is measured using a micro-β-counter.

Immune complex enzyme assays

The acid-treated enolase is diluted 1:20 with 1&times PBS before aliquoting 100 mL/well into a Nunc 96-well high protein binding assay plate. Assay wells are then aspirated; blocked with 0.5% bovine serum, 1&times PBS for 1 h at 37 ℃;and then washed five times with 300 mL of 1&times PBS/well. The source of Lck is either LSTRA cells or Lck expressed in HeLa cells using a vaccinia expression system. FynT is expressed in HeLa cells using the vaccinia system. Cells (12.5&times 106/mL) are lysed in lysis buffer (20 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.5% Nonidet P-40, and 23 trypsin inhibitory units/mL aprotinin), and the lysates are clarified by centrifugation at 14,000 cpm for 15 min at 4 ℃ in an Eppendorf tube. The clarified lysates are then incubated with the appropriate anti-kinase antibody at 10 μg/mL for 2 h at 4 ℃. Protein A-Sepharose beads are added to the antibody/lysate mixture at 250 μL/mL and allowed to incubate for 30 min at 4 ℃. The beads are then washed twice in 1 mL of lysis buffer and twice in 1 mL of kinase buffer (25 mM HEPES, 3 mM MnCl2, 5mM MgCl2, and 100 μM sodium orthovanadate) and resuspended to 50% (w/v) in kinase buffer. Twenty-five microliters of the bead suspension is added to each well of the enolase-coated 96-well high protein binding plate together with an appropriate concentration of compound and [γ-32P]ATP (25 μL/well of a 200 μCi/mL solution in kinase buffer). After incubation for 20 min at 20 ℃, 60 μLl of boiling 2&times solubilization buffer containing 10 mM ATP is added to the assay wells to terminate the reactions. Thirty microliters of the samples is removed from the wells, boiled for 5 min, and run on a 7.5% SDS-polyacrylamide gel. The gels are subsequently dried and exposed to Kodak X-AR film. For quantitation, films are scanned using a Molecular Dynamics laser scanner, and the optical density of the major substrate band, enolase p46, is determined. In companion experiments for measuring the activity of compounds against Lck, the assay plate is washed with two wash cycles on a Skatron harvester using 50 mM EDTA, 1 mM ATP. Scintillation fluid (100 μL) is then added to the wells, and 32P incorporation is measured using a micro-β-counter.

Dosage cellulaire : [3]

Cell lines	HT29, SW480, PMCO1, PLC/PRF/5, KYN-2, Li7, HepG2, MCF-7, MDA-MB-468 and BT-474 cell lines
Concentrations	~100 μM
Incubation Time	2 days
Method	Cell viability is determined using an in vitro toxicology assay kit following the manufacturer`s instructions. Cells are seeded in 96-well plates at day 0. Starting at day 1, cells are treated for 2 days with each of a series of increasing concentrations of PP2 (1 μM, 10 μM, and 100 μM). At the end of this period, cell proliferation is evaluated by a colorimetric assay based on the cleavage of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide by mitochondria dehydrogenase in viable cells, leading to formazan formation. This experiment is repeated three times with 10 determinations/tested concentration.

Étude animale : [3]

Animal Models	SCID mice inoculated HT29 cells in the spleen
Formulation	1% DMSO
Dosages	5 mg/kg/day
Administration	intraperitoneal injection
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversion de différents animaux modèles sur la base de la BSA (valeur basée sur les données des lignes directrices provisoires de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Par exemple, pour modifier la dose de resvératrol utilisée pour une souris (22,4 mg/kg) à une dose basée sur la BSA pour un rat, multiplier 22,4 mg/kg par le facteur Km pour une souris puis diviser par le facteur Km pour un rat. Ce calcul donne une dose équivalente chez le rat pour le resvératrol de 11,2 mg/kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Informations chimiques

Molecular Weight (MW)	301.77
Formula	C15H16ClN5
CAS No.	172889-27-9

Storage	3 years -20℃Powder
Storage	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms	AG 1879,AGL 1879

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	60 mg/mL (198.82 mM)
		Water	<1 mg/mL (
		Ethanol	2 mg/mL (6.62 mM)
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	30 mg/mL
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.