Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
310,35 TSU-68 (SU6668, Orantinib) a la plus grande puissance contre l'autophosphorylation PDGFR avec Ki de 8 nM, mais inhibe également fortement la trans-phosphorylation Flk-1 et FGFR1, peu activité contre IGF-1R, Met, Src, Lck, Zap70, Abl et CDK2; n'inhibe pas l'EGFR. Phase 3.
Activité biologique TSU-68 est un inhibiteur compétitif, en ce qui concerne l'ATP, de la transphosphorylation Flk-1/KDR, de la transphosphorylation FGFR1 et de l'autophosphorylation des kinases PDGFRβ. Le TSU-68 (0,03-10 M) inhibe la phosphorylation de la tyrosine de KDR dans les HUVEC stimulées par le VEGF. TSU-68 inhibe également la phosphorylation de la tyrosine PDGFRβ stimulée par PDGF dans les cellules NIH-3T3 surexprimant PDGFRβ à une concentration minimale de 0,03-0,1 M. TSU-68 inhibe la phosphorylation induite par le FGF acide du substrat FGFR1 2 à 10 M et plus. Cependant, le TSU-68 (jusqu'à 100 M) n'a aucun effet sur la phosphorylation de la tyrosine de l'EGFR stimulée par l'EGF dans les cellules NIH-3T3 surexprimant l'EGFR. Le TSU-68 inhibe la mitogenèse induite par le VEGF et le FGF des HUVEC avec une IC50 moyenne de 0,34 M et 9,6 M, respectivement. Dans les cellules de leucémie myéloïde humaine MO7E, TSU-68 inhibe l'autophosphorylation de la tyrosine du récepteur du facteur de cellules souches (SCF), c-kit, avec une CI50 de 0,1-1 M, ainsi que la phosphorylation ERK1/2, un événement de signalisation en aval de c- activation des kits. Le TSU-68 inhibe également la prolifération induite par le SCF des cellules MO7E avec une CI50 de 0,29 M et induit l'apoptose. Le TSU-68 (75-200 mg/kg) induit une inhibition de la croissance tumorale contre un large éventail de types de tumeurs dans des modèles de xénogreffe chez des souris athymiques, notamment les cellules A375, Colo205, H460, Calu-6, C6, SF763T et SKOV3TP5. Le TSU-68 (75 mg/kg) supprime également l'angiogenèse tumorale des xénogreffes de gliome C6. Dans un modèle tumoral de carcinome du côlon humain HT29, le TSU-68 (200 mg/kg) diminue la perméabilité vasculaire moyenne et le volume plasmatique fractionnaire moyen dans le bord et le noyau de la tumeur. Le TSU-68 favorise le développement anormal du stroma à la périphérie des carcinomes. Dans un modèle de tumeur hépatique VX2 de lapin, le TSU-68 (200 mg/kg) augmente l'effet de la perfusion chimiothérapeutique.
Réactions de trans-phosphorylation Les dosages de tyrosine kinase pour quantifier l'activité de trans-phosphorylation de Flk-1 et FGFR1 sont effectués dans des plaques de microtitration à 96 puits pré-revêtues (20 g/puits dans du PBS ; incubées une nuit à 4 °C) avec le substrat peptidique poly-Glu,Tyr (4:1). Les sites de liaison aux protéines en excès sont bloqués avec 1 à 5 % (p/v) de BSA dans du PBS. Les protéines de fusion GST-FGFR1 (domaine kinase) ou GST-Flk-1 (domaine cytoplasmique) purifiées sont ensuite ajoutées aux puits de microtitrage dans un tampon de dilution de kinase à concentration 2 x composé de 100 mM de HEPES, 50 mM de NaCl, 40 M de NaVO4 et 0,02 % (p/v) BSA. La concentration finale en enzyme pour GST-Flk-1 et GST-FGFR1 est de 50 ng/mL. SU6668 est dissous dans du DMSO à 100 fois la concentration finale requise et dilué à 1:25 dans H2O. Vingt-cinq L de SU6668 dilué sont ensuite ajoutés dans chaque puits de réaction. La réaction de kinase est initiée par l'ajout de différentes concentrations d'ATP dans une solution de MnCl2 de sorte que les concentrations finales d'ATP couvrent le Km de l'enzyme et que la concentration finale de MnCl2 soit de 10 mM. Les plaques sont incubées pendant 5-15 min à température ambiante avant d'arrêter la réaction avec l'ajout d'EDTA. Les plaques sont ensuite lavées trois fois avec du TBST. Des antisérums polyclonaux antiphosphotyrosine de lapin sont ajoutés dans les puits à une dilution de 1 : 10000 dans du TBST contenant 0,5 % (p/v) de BSA, 0,025 % (p/v) de lait écrémé en poudre et 100 M de NaVO4 et incubés pendant 1 heure à 37° C. Les plaques sont ensuite lavées trois fois avec du TBST, suivi par l'ajout d'antisérums anti-lapin de chèvre conjugués avec HRP. Les plaques sont incubées pendant 1 heure à 37°C puis lavées trois fois avec du TBST. La quantité de phosphotyrosine dans chaque puits est quantifiée après l'ajout de 2,2 Méthode
Les cellules sont ensemencées (3 × 105 cellules/puits de 35 mm) dans du DMEM contenant 10 % (v/v) de FBS et poussent jusqu'à confluence puis mis au repos dans du DMEM contenant 0,1 % de sérum pendant 2 heures avant le traitement médicamenteux. Les HUVEC (ensemencées à 2 × 106 cellules/plaque de 10 cm) sont cultivées jusqu'à confluence dans des milieux de croissance de cellules endothéliales, puis mises au repos dans des milieux basaux de cellules endothéliales contenant 0,5 % de FBS pendant 24 heures avant le traitement médicamenteux. Toutes les lignées cellulaires sont incubées avec SU6668 pendant 1 heure avant la stimulation du ligand (100 ng/mL) pendant 10 min. Le buvardage occidental est effectué

Groupes de Produits : Protéine Tyrosine Kinase > Inhibiteur VEGFR