Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
412,42 Le capmatinib (INCB28060) est un nouvel inhibiteur compétitif de l'ATP de la c-MET avec une CI50 de 0,13 nM, inactif contre RONβ, ainsi que contre EGFR et HER-3 . Phase 1.
Activité biologique INCB28060 présente une puissance enzymatique picomolaire et est hautement spécifique pour c-MET avec une sélectivité plus de 10 000 fois sur un large panel de kinases humaines. L'INCB28060 inhibe la phosphorylation du c-MET humain et la signalisation médiée par le c-MET dans les cellules cancéreuses. L'INCB28060 inhibe la prolifération et la survie cellulaires dépendantes de c-MET, et empêche la croissance et la migration cellulaire des cellules cancéreuses indépendantes de l'ancrage. INCB28060 montre une forte activité antitumorale dans des modèles de tumeurs murines dépendantes de c-MET, même un traitement oral de 0,03 mg/kg d'INCB28060 provoque une inhibition d'environ 50 % de la phosphorylation de c-MET. Une inhibition dose-dépendante de la croissance tumorale est observée chez les souris porteuses de tumeurs.
Dosage c-Met Kinase Le tampon de dosage contient 50 mM de Tris-HCl, 10 mM de MgCl2, 100 mM de NaCl, 0,1 mg/ml de BSA, 5 mM de DTT, pH 7,8. Pour HTS 0,8 L de 5 mM d'INCB28060 dissous dans du DMSO sont parsemés sur des plaques 384 puits. Le titrage DMSO suggère que la concentration maximale tolérée du solvant est de 4 %. Pour mesurer les CI50, la plaque INCB28060 est préparée par des dilutions en série 3 fois et 11 points. 0,8 L d'INCB28060 dans du DMSO est transféré de la plaque INCB28060 à la plaque de dosage. La concentration finale de DMSO est de 2%. Des solutions de 8 nM de c-Met non phosphorylé ou 0,5 nM de c-Met phosphorylé sont préparées dans un tampon de dosage. Une solution mère 1 mM de substrat peptidique Biotine-EQEDEPEGDYFEWLE-amide dissous dans du DMSO est diluée à 1 µM dans un tampon de dosage contenant 400 µM d'ATP (c-Met non phosphorylé) ou 160 µM d'ATP (c-Met phosphorylé). Un volume de 20 L de solution enzymatique (ou de tampon de dosage pour le blanc enzymatique) est ajouté dans les puits appropriés de chaque plaque puis 20 L/puits de solution de substrat pour initier la réaction. La plaque est protégée de la lumière et incubée à 25 °C pendant 90 minutes. La réaction est arrêtée en ajoutant 20 L d'une solution contenant 45 mM d'EDTA, 50 mM de Tris-HCl, 50 mM de NaCl, 0,4 mg/ml de BSA, 200 nM de SA-APC et 3 nM d'EUPy20. La plaque est incubée pendant 15-30 minutes à température ambiante et HTRF (fluorescence homogène résolue en temps) est mesurée sur un instrument Perkin Elmer Fusion -FP. Les paramètres du programme HTRF utilisés sont les suivants : Filtre d'excitation primaire 330/30, Fenêtre primaire : 200 uSec, Délai primaire : 50 uSec, Nombre de flashs : 15, Temps de lecture du puits : 2000 Les cellules de la méthode H441 sont ensemencées dans un milieu RPMI-1640 contenant 10% FBS et cultivé jusqu'à confluence complète. Les lacunes sont introduites en grattant les cellules avec une pointe de pipette P200. Les cellules sont ensuite stimulées avec 50 ng/mL de HGF humain recombinant pour induire une migration à travers l'espace en présence de diverses concentrations d'INCB28060. Après une nuit d'incubation, des photographies représentatives sont prises et une évaluation semi-qualitative de l'inhibition de la migration cellulaire est réalisée.

Groupes de Produits : Protéine Tyrosine Kinase > Inhibiteur c-Met