Description du produit Poids moléculaire : 519,28 H 89 2HCl est un puissant inhibiteur de la PKA avec un Ki de 48 nM, 10 fois plus sélectif pour la PKA que la PKG, plus de 500 fois la sélectivité que la PKC, la MLCK, la calmoduline kinase II et la caséine kinase I/II.
Activité biologique H89 2HCl est un puissant inhibiteur de la protéine kinase A PKA (dépendant de l'AMPc) avec un Ki de 48 nM, présente une sélectivité 10 fois supérieure à la PKG, une sélectivité > 500 fois supérieure à la PKC, MLCK, la calmoduline kinase II et la caséine kinase I/ II. Le prétraitement des cellules avec du H-89 (30 M) 1 h avant l'ajout de forskoline inhibe de façon dose-dépendante la phosphorylation des protéines induite par la forskoline de façon marquée. H89 inhibe également plusieurs autres kinases avec une CI50 de 80, 120, 135, 270, 2600 et 2800 nM pour S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα et MAPKAP-K1b, respectivement. H89 a également une activité sur certains récepteurs cellulaires et canaux ioniques, y compris les canaux Kv1.3 K+, β1AR et β2AR. H89 provoque des modifications distinctes de la phosphorylation des protéines, les changements les plus robustes dans la phosphorylation étant la fructose-1,6-biphosphatase, la ribonucléoprotéine nucléaire hétérogène (hnRNP), le cofacteur NSFL1 p47, tous qui ont des connexions potentiellement régulatrices avec l'AMPc/PKA. Protocole (uniquement pour référence) Dosage de la kinase : [1]

PKA enzyme activity	cAMP-dependent protein kinase activity is assayed in a reaction mixture containing, in a final volume of 0.2 mL, 50 mM Tris-HC1 (pH 7.0), 10 mM magnesium acetate, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP or absence of cAMP, 3.3-20 μM [γ-32P]ATP (4 × 105 cpm), 0.5 μg of the enzyme, 100 μg of histone H2B, and each compound, as indicated.

Dosage cellulaire : [1]

Cell lines	PC12D
Concentrations	~30 μM
Incubation Time	1 h
Method	Levels of intracellular cAMP are determined. After 48 h in culture, PC12D cells are cultured in test medium containing 30 μM H-89 for 1 h and then exposed to fresh medium that contained both 10 μM forskolin and 30 μM H-89. Cells are scraped off with a rubber policeman and sonicated in the presence of 0.5 ml of 6% trichloroacetic acid. To extract trichloroacetic acid, 2 ml of petroleum ether is added, the preparation mixed and centrifuged at 3000 rpm for 10 min. After aspiration of the upper layer, the residue sample solution is used for determination.

Étude animale : [5][6]

Animal Models	rat; mice
Formulation	Dissolved in 100% DMSO, diluted 1:20 in 0.9% sterile saline (Rat); 1% DMSO (Mice)
Dosages	20 or 200 mg/kg (Rat); 0-5 mg/kg (Mice)
Administration	s.c. (Rat); i.p. (Mice)
Solubility	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80, 30 mg/mL
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

Conversion de différents animaux modèles sur la base de la BSA (valeur basée sur les données des lignes directrices provisoires de la FDA)

Species	Baboon	Dog	Monkey	Rabbit	Guinea pig	Rat	Hamster	Mouse
Weight (kg)	12	10	3	1.8	0.4	0.15	0.08	0.02
Body Surface Area (m2)	0.6	0.5	0.24	0.15	0.05	0.025	0.02	0.007
Km factor	20	20	12	12	8	6	5	3

Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by	Animal B Km
	Animal A Km

Par exemple, pour modifier la dose de resvératrol utilisée pour une souris (22,4 mg/kg) à une dose basée sur la BSA pour un rat, multiplier 22,4 mg/kg par le facteur Km pour une souris puis diviser par le facteur Km pour un rat. Ce calcul donne une dose équivalente chez le rat pour le resvératrol de 11,2 mg/kg.

Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×	mouse Km(3)	= 11.2 mg/kg
	rat Km(6)

Informations chimiques

Molecular Weight (MW)	519.28
Formula	C20H20BrN3O2S.2HCl
CAS No.	130964-39-5

Storage	3 years -20℃Powder
	6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
Synonyms

Solubility (25°C) *	In vitro	DMSO	104 mg/mL (200.27 mM)
		Water	6 mg/mL (11.55 mM)
		Ethanol	<1 mg/mL (
	In vivo	1% DMSO/30% polyethylene glycol/1% Tween 80	30 mg/mL

Chemical Name	(E)-N-(2-(4-bromocinnamylamino)ethyl)isoquinoline-5-sulfonamide dihydrochloride

Calculateur de molarité Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

Groupes de Produits : Autres > Inhibiteur PKA