Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
368,46 CYC116 est un puissant inhibiteur d'Aurora A/B avec Ki de 8,0 nM/9,2 nM, est moins puissant pour VEGFR2 (Ki de 44 nM), avec 50- puissance plus élevée que les CDK, non active contre PKA, Akt/PKB, PKC, aucun effet sur GSK-3α/β, CK2, Plk1 et SAPK2A. Phase 1.
Activité biologique Le CYC116 le plus sélectif pour Aurora montre un effet inhibiteur sur les kinases Aurora A et B 50 fois plus puissant que n'importe lequel des CDK testés. CYC116 est initialement criblé contre un panel de lignées cellulaires de leucémie humaine et de tumeur solide à l'aide d'un test antiprolifératif MTT. Les résultats montrent que CYC116 a une activité antitumorale à large spectre et présente une cytotoxicité spécifique contre la lignée cellulaire de leucémie myéloïde aiguë MV4-11 avec une CI50 de 34 nM. De plus, l'activité anti-proliférative de CYC116 s'avère associée à la modulation d'Aurora A et B telle que l'inhibition de l'autophosphorylation d'Aurora, la réduction de la phosphorylation de l'histone H3, la polyploïdie, suivie d'une mort cellulaire, résultant d'un échec de la cytokinèse. Les souris porteuses de xénogreffes sous-cutanées NCI-H460 reçoivent du CYC116 par voie orale pendant 5 jours, à des doses de 75 et 100 mg/kg qd. Cela entraîne des retards de croissance tumorale de 2,3 et 5,8 jours, qui se traduisent par des retards de croissance spécifiques de 0,32 et 0,81, respectivement. .
Dosages de la kinase Les dosages de la kinase Aurora A sont effectués à l'aide d'un volume réactionnel de 25 L (25 mM de β-glycérophosphate, 20 mM de Tris/HCl, pH 7,5, 5 mM d'EGTA, 1 mM de DTT, 1 mM de Na3VO4, 10 g de kemptide (peptide substrat)). La kinase Aurora A recombinante est diluée dans 20 mM de Tris/HCl, pH 8, contenant 0,5 mg/mL de BSA, 2,5 % de glycérol et 0,006 % de Brij-35. Les réactions sont déclenchées par l'ajout de 5 L de mélange Mg/ATP (15 mM de MgCl2, 100 M d'ATP, avec 18,5 kBq de γ-32P-ATP par puits) et incubées à 30°C pendant 30 minutes avant la fin avec 25 μL de 75 mM H3PO4. Les dosages de la kinase Aurora B sont effectués comme Aurora A, sauf qu'avant utilisation, Aurora B est activé dans une réaction séparée à 30°C pendant 60 minutes avec la protéine du centromère interne. Méthode
Des tests MTT standard sont effectués. En bref, les cellules sont ensemencées dans des plaques à 96 puits selon le temps de doublement et incubées une nuit à 37°C. Les composés à tester sont préparés dans du DMSO, une série de dilutions de 3 fois est préparée dans 100 L de milieu cellulaire, ajoutée aux cellules (en triple) et incubée pendant 72 ou 96 heures à 37°C. Le MTT est constitué d'un stock de 5 mg/mL en milieu cellulaire, et la solution est stérilisée par filtration. Le milieu est retiré des cellules suivi d'un lavage avec du PBS. Une solution de MTT est ensuite ajoutée à 20 L/puits et incubée à l'obscurité à 37°C pendant 4 heures. La solution de MTT est éliminée et les cellules sont à nouveau lavées avec 200 µL de PBS. Le colorant MTT est solubilisé avec 200 L/puits de DMSO par agitation. L'absorbance est lue à 540 nm et les données analysées à l'aide d'un logiciel d'ajustement de courbe pour déterminer les valeurs IC50.

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur d'Aurora Kinase