Description du produit .cp_wz table {border-top : 1px solide #ccc;border-left:1px solide #ccc ; } .cp_wz table td{border-right : 1px solide #ccc ; border-bottom : 1px solide #ccc ; remplissage : 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right : 1px solid #ccc;border-bottom : 1px solid #ccc ; rembourrage : 5px 0px 0px 5px ;}
Poids moléculaire :
379.459 LAQ824 (Dacinostat) est un nouvel inhibiteur HDAC avec IC50 de 32 nM et est connu pour activer le promoteur p21.

Activité biologique LAQ824 active l'expression de le gène codant pour l'inhibiteur du cycle cellulaire p21 en activant le promoteur p21 avec 50 % de l'activation maximale du promoteur (AC50) de 0,30 µM. LAQ824 inhibe la croissance cellulaire de H1299, une lignée de carcinome pulmonaire non à petites cellules, et HCT116, une lignée cellulaire de cancer du côlon avec une CI50 de 0,15 M et 0,01 M, respectivement, et l'effet antiprolifératif de LAQ824 est sélectif envers les lignées cellulaires tumorales tout en induisant uniquement un arrêt de croissance dans les fibroblastes normaux. De plus, LAQ824 induit une augmentation dose-dépendante de la protéine p21 dans les cellules A549 et une augmentation de l'état hypophosphorylé du suppresseur de tumeur Rb. Une étude récente montre que LAQ824 induit des modifications de la chromatine au niveau du promoteur du gène IL-10 qui conduisent à un recrutement accru des répresseurs transcriptionnels HDAC11 et PU.1 et inhibe la production d'IL-10 dans les macrophages murins BALB/c. Dans le HCT116 et les xénogreffes de tumeurs du côlon humain chez la souris nude, le traitement au LAQ824 à 100 mg/kg produit des effets inhibiteurs sur la croissance tumorale selon un mode dose-dépendant sans cytotoxicité générale.
Dosage in vitro de l'histone désacétylase Les enzymes HDAC sont partiellement purifiées à partir du lysat cellulaire H1299 par chromatographie échangeuse d'ions à l'aide de la colonne Q Sepharose Fast Flow. Les complexes enzymatiques sont collectés à partir de 500 mg de lysat cellulaire total par immunoprécipitation avec l'anticorps polyclonal cdk2 ou l'anticorps monoclonal cdk1/cdc2. Les immunoprécipités sont remis en suspension dans du tampon kinase (50 mM Hepes, pH 8, 10 mM de MgCl2, 2,5 mM d'EDTA, 1 mM de dithiothréitol, 20 mM d'ATP, 10 mM de β-glycérophosphate, 0,1 mM de NaVO4, 1 mM de fluorure de sodium, 50 mM d'ATP, 10 Ci de [γ-32P]ATP) avec 1 g de substrat protéique recombinant pRb (cdk2) ou 10 mL de mélange d'histones H1 contenant 20 g de substrat (cdc2). Les histones Rb et H1 phosphorylées sont résolues par électrophorèse et quantifiées à l'aide d'un PhosphorImager.
Méthode La prolifération cellulaire est mesurée en utilisant une adaptation des procédures publiées (3-(4,5-diméthylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxyméthoxy-phényl)-2-(4-sulfonyl)-2H-tétrazolium dosage ). Les cellules sont ensemencées dans des boites 12 puits et cultivées dans du RPMI 1640 contenant 10 % de FBS. Les cellules sont cultivées en présence de différentes concentrations de TSA (jusqu'à 1000 ng/mL). Pour examiner l'inhibition de la croissance par la TSA, le nombre de cellules viables est déterminé par exclusion de colorant bleu trypan, compté dans un hémocytomètre de type Nesbauer pendant 0 heure, 24 heures et 48 heures. La même quantité d'éthanol est ajoutée au milieu RPMI 1640 que l'expérience témoin. Toutes les expériences sont réalisées en double et répétées 3 fois. La valeur de fond moyenne (traitement avec le milieu seul) est soustraite de chaque puits expérimental ; les valeurs en triple sont moyennées pour chaque dilution de composé. Les formules suivantes sont utilisées pour calculer le pourcentage de croissance : Si X0, %Growth=(X-T0)/T0*100 ; Si X>T0, %Croissance=(X-T0)/(GC-T0)*100. où T0 est la valeur moyenne de T0 - fond, GC est la valeur moyenne des cellules non traitées (en triple) - fond, et X est la valeur moyenne des cellules traitées avec le composé (en triple) - fond. Le [% de croissance" est tracé en fonction de la concentration de composé et utilisé pour calculer la CI50 en utilisant les techniques de régression linéaire entre les points de données pour prédire la concentration de composés à 50 % d'inhibition.

Groupes de Produits : Épigénétique > Inhibiteur HDAC